一、水体毒性及其检测的重要性

在日常生活中,水体污染事件时有发生,导致水体具有毒性。当遇到水源水、地下水、湖泊河流等水体污染时,若无法确定污染源,水质检测人员首要任务是确定水体是否具有毒性,毒性程度如何,以及对误食、误饮的生物是否具有危害性。国家对水质急性毒性限值及检测有相应标准,目前常用的检测方法包括斑马鱼卵法和发光细菌法。


发光细菌法检测原理

发光细菌法基于发光细菌与水样接触后发光强度的变化来评估水样的急性毒性。水样中的毒性组分与发光细菌接触后,会抑制细菌的发光强度,且这种抑制率与毒性组分的总浓度呈负相关。通过生物发光光度计测定水样与发光细菌接触一定时间后的发光抑制率,可表征水样的急性毒性水平。


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二、检测所需试剂与仪器

(一)检测试剂

实验室超纯水:常温保存。

氯化汞母液(2000 mg/L)。

复苏稀释液(0.85%的氯化钠溶液)。

渗透压液(17%的氯化钠溶液)。

青海弧菌Q67。

(二)检测仪

生物发光光度计:技术规格包括可探测光谱范围320 nm~1000 nm;探测结果范围0~65535 RLU;最快检测时间5分钟;相对发光强度0-200%;可进行ATP测试;测试试管规格为5 mL的反应试管和10 mL的测试试管。


三、检测条件

(一)室温条件

室温应控制在20-25℃,同一批样品在测试过程中要求温度波动不超过±1℃。所有测试器皿及试剂、溶液在测试前1小时均需置于控温的测试室内。

(二)pH条件

若需测定包括pH影响在内的急性毒性,不应调节水样pH。

若需测定排除pH影响在内的急性毒性,需将水样和复苏液(氯化钠0.85 g/100 mL)pH调至以下值:主要含铜的水样为4.5,主要含其他金属水样为5.4,主要含有机化合物水样为7.0。


四、水样毒性检测步骤

(一)排列检测试管

在塑料或铁制试管架上按以下要求排列试管:

第一排:依次为反应管01-标准品、反应管02-阴性/阳性质控和反应管03-水样。

第二排:依次为测试管01-标准品、测试管02-阴性/阳性质控和测试管03-水样。

(二)青海弧菌Q67冻干粉剂复苏

从冷冻环境(-18℃)中取出青海弧菌Q67冻干粉(含量约为0.0015-0.0018 g)小瓶,在常温环境(25℃左右)下放置15分钟,启开并轻敲小瓶,确保冻干细菌充分落在小瓶底部。移取0.5 mL 0.85%的复苏液或3%的复苏液至菌种中,摇匀,放置10分钟后可以使用。

(三)检测步骤

打开生物发光光度计电源,预热15分钟,调零,备用。

分别往三支反应试管中加入2 mL的标准品(稀释液),2 mL(1:19-稀释液:样品)的阴性质控及2 mL(1:19-稀释液:样品)的被测水样。

待冻干粉复苏时间到后,分别往反应管中加入50 µL冻干粉复苏试剂(注意混匀)。

混匀后,等待15分钟反应时间。

分别从反应试管中移取350 µL混合液至测试管中(注意尽量不要溅到瓶壁上)。

将测试试管按顺序分别放入主机中,最终结果以RLI%发光强度表示。




本文标题:水体毒性检测仪守护水质安全全面监测解析
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